離子色譜柱是液相的心臟,大部分色譜譜圖問(wèn)題都來(lái)自于色譜柱,色譜填料的主要用途是對(duì)混合物質(zhì)進(jìn)行分離,然后通過(guò)后處理以達(dá)到對(duì)各組分進(jìn)行定性和定量。
常見(jiàn)離子色譜柱色譜填料有以下幾個(gè)分類:
1、 反相(與離子對(duì))方法(填料為非極性)
C18(十八烷基或ODS)----------- 普適性好;保留性強(qiáng),用途廣
C8(辛基) -----------與C18相似,但保留值稍小
C3,C4 -----------保留值小;大多用于肽類與蛋白質(zhì)
C1【*基硅烷(TMS)】------保留值z(mì)ui??;zui不穩(wěn)定
苯基,苯乙基 -----------保留值適中;選擇性有所不同
CN(氰基) -----------保留值適中;正相和反相均可使用
NH2(氨基) -----------保留性弱;用于烴類;欠穩(wěn)定
聚苯乙烯基b -----------在1<PH<13的流動(dòng)相中穩(wěn)定;對(duì)某些分 離峰形好,柱子壽命長(zhǎng)
2、 正相方法(填料為極性的)
CN(氰基) -----------普適性好;極性適中;用途廣
OH(二醇基) -----------極性大于CN
NH2(氨基) -----------極性大,欠穩(wěn)定
硅膠b ------------普適性好;價(jià)廉;操作欠方便;用于制備LC
3、 空間排阻方法
硅膠b -----------普適性*;作吸附劑用
硅烷化硅膠 -----------吸附性弱,溶劑兼容性好;適用于有機(jī)溶劑
OH(二醇基) ------------欠穩(wěn)定;在水SEC中使用(凝膠過(guò)濾)
聚苯乙烯基b ------------廣泛用于有機(jī)SEC(凝膠滲透);一般與水和極性大的有機(jī)溶劑不相容
4、 離子交換方法
鍵合相 ------------穩(wěn)定性與重現(xiàn)性均不好
聚苯乙烯基b -------------柱效不高;穩(wěn)定;重現(xiàn)性好
一般無(wú)特別說(shuō)明反相方法填料都是指硅膠基質(zhì)鍵合相,而以硅膠為基質(zhì)鍵合的C18填料在反相色譜中發(fā)揮著巨大作用,它可完成液相色譜70——80%的分析任務(wù), 因?yàn)橛兄^高的碳含量和更好的疏水性,對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力,因此在生物化學(xué)分析工作中應(yīng)用的。
ODS,octadecyl silane的縮寫,即十八(烷)基硅烷,是以硅膠為基質(zhì)鍵合的C18填料,所以O(shè)DS-C18通常簡(jiǎn)稱C18,而因?yàn)镃18用于反相色譜,也即RP-C18。