反相色譜是迄今在高效液相色譜中應用*廣泛的技術，主要是因為它適用于分析極大多數的非極性物質和很多的可離子化的及離子化合物。大多數用于反相色譜的固定相本質上都是疏水物質，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小程度來分離的，樣品基體中其它疏水雜質組分也能以同樣的方式保留。

　　反相色譜柱是一種常用的色譜柱產品，主要由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成，被廣泛用于多個領域中。在反相色譜柱的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長柱子的使用壽命非常重要。使用時間后就會出現柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化，如不采取措施，將會縮短色譜柱的使用壽命，影響工作效率，并造成一定的經濟損失。

　　反相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點：

　　1、避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質有腐蝕作用；

　　2、緩沖液要現配現用，往往緩沖液是良好的菌類培養液，隔天或放置長時間實驗時會發生很多怪現象；

　　3、使用緩沖液要及時掌握pH范圍，做到胸中有數；

　　4、清洗液路和柱子時，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗；

　　5、長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出，若有白色鹽類析出，定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞；

　　6、選擇緩沖液要用的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩；