咨詢熱線:
021-34610856
東曹生命科學(Tosoh Bioscience)是色譜分離解決方案供應商,近日宣布對現(xiàn)有SkillPak預裝柱產品線進行了拓展,推出了2.5 cm I.D.和5.0 cm I.D.兩種規(guī)格的層析柱新品,用于單克隆抗體、抗體片段、ADC、寡核苷酸以及病毒等生物大分子的純化工藝開發(fā)。
SkillPak預裝填有親和、陰/陽離子交換、疏水以及尺寸排阻等各種分離模式的TOYOPEARL或TSKgel層析填料,性能優(yōu)異、穩(wěn)定可靠,可與常用的低壓或中壓液相色譜層析系統(tǒng)配合使用。SkillPak不僅可以重復再生使用,還充分考慮了每種填料不同的裝填壓縮比,能夠精確展示各種尺寸層析柱的純化效果。
公司現(xiàn)有產品1 mL和5 mL SkillPak主要用于純化工藝開發(fā)或變更時進行參數(shù)和方法的優(yōu)化,以及耐用性的測試等。此次新上市的50 mL和200 mL規(guī)格的層析柱可將開發(fā)好的純化工藝線性放大。
SkillPak預裝層析柱的應用
1. 抗體純化工藝中洗脫pH值的確定
在mAb純化工藝中,找到適合mAb洗脫的緩沖溶液和pH值,可降低樣品中聚集體增加的風險。為了確定mAb結合和洗脫的條件,我們將含CHO細胞培養(yǎng)上清液的mAb進樣至預裝有TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F填料的SkillPak層析柱中。
圖1. 使用1 mL和5 mL SkillPak確定mAb洗脫pH值
圖1中的A和B顯示了使用線性pH值梯度在pH 3.5時獲得尖銳的mAb組分峰 (洗脫大)。為了提高回收率,可選擇pH 3.3~3.5進行分步洗脫。
2. 下游工藝的無縫放大
我們使用裝填了陰離子交換填料TOYOPEARL NH2-750F的不同尺寸的SkillPak層析柱分離蛋白標準品。
下圖中蛋白標準品的分離結果顯示,不同尺寸層析柱上其洗脫曲線相似,證明了SkillPak出色的放大能力。
圖2. 不同尺寸的SkillPak分離蛋白標準品
同時,我們還在5 mL、50 mL和200 mL的SkillPak層析柱上測定了牛血清白蛋白 (BSA) 的動態(tài)吸附載量。BSA在不同尺寸的SkillPak上動態(tài)吸附載量值非常接近,大偏差為4%,表明吸附能力與層析柱尺寸無關,這一點對于工藝放大時的上樣量來說非常重要。
表1. 不同尺寸SkillPak上BSA的動態(tài)吸附載量
如您想了解SkillPak預裝柱的詳細信息,歡迎聯(lián)系我們索取產品資料或申請免費試用 ??Tel:(021)34610856 轉219分機。